ห้องปฏิบัติการทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์
1. เทคนิคในการวิเคราะห์
เทคนิค 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide assay (MTT)
2. เครื่องมือที่ใช้ในห้องปฎิบัติการ
- ระบบห้อง Cleanroom class 10,000
- ตู้ปฏิบัติการปลอดเชื้อมาตรฐาน biological hazard รุ่น HVB1205 หมายเลขเครื่อง L120003
- ตู้ Incubator (BINDER), S/N :WTB09-11043
- เครื่อง Microscope (Olympus, IX71)
- เครื่อง Microplate reader (EMax Plus)
3. วัตถุประสงค์
ให้บริการตรวจวิเคราะห์การเจริญและรอดชีวิตของเซลล์ (cell viability) จากอุปกรณ์เครื่องมือแพทย์และชีววัสดุทางแพทย์ตามมาตรฐาน ISO 10993-5 (E): 2009 และตัวอย่างสมุนไพร (สำหรับงานวิจัยร่วม) ภายใต้กฎหมายฝ่ายประกันคุณตาม ISO 9001
4. สถานที่
อาคาร 7 สถาบันเทคโนโลยีนิวเคลียร์แห่งชาติ (องค์การมหาชน) ต. ทรายมูล อ. องครักษ์ จ. นครนายก
5. ผู้ติดต่อ
- นางสาวพิมพ์พร อุทยารัตน์ Email: pimponu@tint.or.th
- นางสาวรัตนากรณ์ เชียงหนุ้น Email: rattanakorn@tint.or.th
6. วิธีการวิเคราะห์
ใช้เทคนิค MTT ตามมาตรฐาน ISO 10993-5 (E): 2009 และใช้วิธีสกัดสารตัวอย่างตามมาตฐาน ISO 10993-12: 2021 โดยบ่มตัวอย่าง ในอาหารเพาะเลี้ยงเซลล์อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 24 – 72 ชั่วโมง เพื่อสกัดสารที่อาจหลุดลอดออกมาจากตัวอย่างไว้ในอาหารบ่มเลี้ยงเซลล์ จากนั้นนำสารสกัดมาทดสอบกับเซลล์ในถาด 96 หลุม ที่ความเข้มข้นต่าง ๆ ในช่วง 10-100% (v/v) เมื่อเติมสารละลาย MTT ลงในถาดหลุม ปฏิกิริยารีดักชั่นที่เกิดขึ้นจะทำให้เกลือ tetrazolium เริ่มต้นเปลี่ยนเป็นผลึก formazan ที่สามารถตรวจวัดเชิงปริมาณได้ด้วยเครื่อง microplate reader ซึ่งค่าการดูดกลืนแสงจะแปรผันโดยตรงกับจำนวนเซลล์ที่ยังคงชีวิต
ตารางที่ 1 แสดงเกณฑ์กำหนดตัวอย่างอุปกรณ์เครื่องมือแพทย์และชีววัสดุทางการแพทย์ที่รับทดสอบ
| Thickness
(mm) | Extraction ratio a ±10% | Examples of Material |
| ≤0.5 | 6 cm2/ml | Metal, synthetic polymer, ceramic, composite film, sheet, and tubing walls |
| >0.5 | 3 cm2/ml | Metal, synthetic polymer, ceramic, composite tubing walls, slab, molded items |
| ≤1.0 | 3 cm2/ml | Natural elastomer |
| >1.0 | 1.25 cm2/ml | Natural elastomer |
| Irregular | 0.1-0.2 g/ml, 6 cm2/ml | Pellets |
| a Expressed as the ratio of the surface area or mass of the test sample to the volume of extractant used |
รูปแบบการรายงานผล: รายงานเป็นร้อยละการเจริญและรอดชีวิตของเซลล์ (% viability) และแนวโน้มความเป็นพิษต่อเซลล์
7. ข้อจำกัด
- ปี 2566 รับเฉพาะตัวอย่างที่เป็นอุปกรณ์เครื่องมือแพทย์และชีววัสดุทางการแพทย์เท่านั้น สำหรับตัวอย่างสมุนไพรจะเป็นรูปแบบงานวิจัยร่วมกัน
- ตัวอย่างต้องปลอดเชื้อ ถ้าหากยังไม่ปลอดเชื้อให้ติดต่อพิมพ์พร (e-mail ด้านบน)
- ถ้าตัวอย่างนอกเหนือจากที่ระบุใน ตารางที่ 1 ให้ติดต่อพิมพ์พร (e-mail ด้านบน)
8. อัตราค่าบริการ
| รายการ | ราคา (บาท/ตัวอย่าง) | หมายเหตุ |
| ทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ (ทดสอบด้วยเทคนิค MTT มาตรฐาน) | 8,560 | ทดสอบ 3 ตัวอย่างขึ้นไปต่อครั้ง ตัวอย่างที่ 4, 5 และตัวอย่างถัดไป คิดตัวอย่างละ 7,490 บาท (รวมภาษีมูลค่าเพิ่ม) |
| ทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ (ทดสอบด้วยเทคนิค MTT แบบความแม่นยำสูง) | 10,700 | ทดสอบ 3 ตัวอย่างขึ้นไปต่อครั้ง ตัวอย่างที่ 4, 5 และตัวอย่างถัดไป คิดตัวอย่างละ 9,630 บาท (รวมภาษีมูลค่าเพิ่ม) |
9. คู่มือที่เกี่ยวข้อง
- SD-RDC-55 เรื่อง เทคนิคการวิเคราะห์การมีชีวิตรอดและเจริญได้ของเซลล์
- SD-RDC-58 เรื่อง คู่มือการเตรียมตัวอย่างสำหรับส่งทดสอบและแนวทางการสกัดตัวอย่าง
- SD-RDC-59 เรื่อง คู่มือการนำส่งตัวอย่างสำหรับทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์
- SD-RDC-60 เรื่อง คู่มือการทดสอบตัวอย่างความเป็นพิษต่อเซลล์
ผู้จัดทำ: รัตนากรณ์ เชียงหนุ้น
original: Dec 2019 | updated: Jan 2024