Skip to content

Cytotoxicity Lab – Ongkharak

ห้องปฏิบัติการทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์

  1. เทคนิคในการวิเคราะห์

เทคนิค 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide assay (MTT)

  1. เครื่องมือที่ใช้ในห้องปฎิบัติการ
  • ระบบห้อง Cleanroom class 10,000
  • ตู้ Horizontal laminar flow hood (BSC II) รุ่น HVB1205 หมายเลขเครื่อง L120003
  • ตู้ Incubator (BINDER), S/N :WTB09-11043
  • เครื่อง Microscope (Olympus, IX71)
  • เครื่อง Microplate reader (EMax Plus)
  1. วัตถุประสงค์

ให้บริการตรวจวิเคราะห์การเจริญและรอดชีวิตของเซลล์ (cell viability) จากอุปกรณ์เครื่องมือแพทย์และชีววัสดุทางแพทย์ตามมาตรฐาน ISO 10993-5 (E): 2009 และตัวอย่างสมุนไพร (สำหรับงานวิจัยร่วม)  ภายใต้กฎหมายฝ่ายประกันคุณตาม ISO 9001

  1. สถานที่

อาคาร 7 สถาบันเทคโนโลยีนิวเคลียร์แห่งชาติ (องค์การมหาชน) อ. องครักษ์ จ. นครนายก

  1. ผู้ติดต่อ
    • นางสาวพิมพ์พร อุทยารัตน์ Email: puttayar@gmail.com, pimponu@tint.or.th
    • นางสาวรัตนากรณ์ เชียงหนุ้น Email: Rattanakorn3781@gmail.com, Rattanakorn@tint.or.th
  2. วิธีการวิเคราะห์

ใช้เทคนิค MTT ตามมาตรฐาน ISO 10993-5 (E): 2009 และใช้วิธีสกัดสารตัวอย่างตามมาตฐาน ISO 10993-12: 2012 โดยบ่มตัวอย่าง ในอาหารเพาะเลี้ยงเซลล์อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 24 – 72 ชั่วโมง เพื่อสกัดสารที่อาจหลุดลอดออกมาจากตัวอย่างไว้ในอาหารบ่มเลี้ยงเซลล์ จากนั้นนำสารสกัดมาทดสอบกับเซลล์ในถาด 96 หลุม ที่ความเข้มข้นต่าง ๆ ในช่วง 10-100% (v/v) เมื่อเติมสารละลาย MTT ลงในถาดหลุม ปฏิกิริยารีดักชั่นที่เกิดขึ้นจะทำให้เกลือ tetrazolium เริ่มต้นเปลี่ยนเป็นผลึก formazan ที่สามารถตรวจวัดเชิงปริมาณได้ด้วยเครื่อง microplate reader ซึ่งค่าการดูดกลืนแสงจะแปรผันโดยตรงกับจำนวนเซลล์ที่ยังคงชีวิต

ตารางที่ 1 แสดงเกณฑ์กำหนดตัวอย่างอุปกรณ์เครื่องมือแพทย์และชีววัสดุทางการแพทย์ที่รับทดสอบ

Thickness

 

 (mm)

Extraction ratio a ±10%Examples of Material
≤0.56 cm2/mlMetal, synthetic polymer, ceramic, composite film, sheet, and tubing walls
>0.53 cm2/mlMetal, synthetic polymer, ceramic, composite tubing walls, slab, molded items
≤1.03 cm2/mlNatural elastomer
>1.01.25 cm2/mlNatural elastomer
Irregular0.1-0.2 g/ml,

 6 cm2/ml

Pellets
a Expressed as the ratio of the surface area or mass of the test sample to the volume of extractant used

รูปแบบการรายงานผล

รายงานเป็นร้อยละการเจริญและรอดชีวิตของเซลล์ (% viability) และแนวโน้มความเป็นพิษต่อเซลล์

  1. ข้อจำกัด
    • ปี 2564 รับเฉพาะตัวอย่างที่เป็นอุปกรณ์เครื่องมือแพทย์และชีววัสดุทางการแพทย์เท่านั้น สำหรับตัวอย่างสมุนไพรจะเป็นรูปแบบงานวิจัยร่วมกัน
    • ตัวอย่างต้องปลอดเชื้อ ถ้าหากยังไม่ปลอดเชื้อให้ติดต่อพิมพ์พร (e-mail ด้านบน)
    • ถ้าตัวอย่างนอกเหนือจากที่ระบุใน ตารางที่ 1 ให้ติดต่อพิมพ์พร (e-mail ด้านบน)

ผู้จัดทำ: รัตนากรณ์ เชียงหนุ้น
original: Dec 2019 | updated: July 2020